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WAVE核苷酸片段分析系统

仪器型号:WAVE 4500???? ????生产厂家:美国Transgenomic公司??????????

变性高效液相色谱(Denaturing High Performance Liquid ChromatographyDHPLC)是一种新的高通量筛选DNA序列变异的技术,其原理是利用离子对反向高效液相色谱原理,通过一个DNA分离柱,进行核苷酸片段的分离和分析。该方法具有自动化、快速、检出率高、检测DNA片段大小范围广等优点。自2006年美国Transgenomic公司对WAVE核苷酸片段分析系统进行全面升级,推出WAVE4500系列产品,4500系列具有更快速精确的变温控制系统,日最大处理样品量400PCR产物,而数据处理时间仅为1小时,若采用Pooling的方式,紫外检测器课题高通量10倍,而荧光检测器可提高灵敏度100倍。

应用范围:

DHPLC能以三种方式操作,不同的操作方式采用的原理不同,其适用的范围也不同。

1、不变性温度条件下(

50),色谱仪类似凝胶电泳仪,可分离分子量不同的双链DNA分子或分析具有长度多态性的片段,类似RFLP分析,也可进行定量RT-PCR及微卫星不稳定性测定(MSI)。

2、在充分变性温度条件下(80),单链DNARNA分子能被区分,适用于寡核苷酸探针合成纯度分析和质量控制。

3、在部分变性的温度条件下,变异型和野生型的PCR产物经过变性复性过程,不仅分别形成同源双链,同时也错配形成异源双链,根据柱子保留时间的不同将同源双链和异源双链分离,从而识别变异型。根据这一原理,可进行基因突变检测、单核苷酸多态性分析(SNPs)和短片段串联重复序列分析(STRs)。

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